酯是一种可用作化学发光标记物的化学物质,盐和相关化合物已被广泛证明为非常有用的化学发光标记物,其稳定性、标记特异性和检测灵敏度都追赶放射性同位素。在碱性条件下,NHS 作为离去基团被取代,蛋白质与酯形成稳定的酰胺键。但是,酯只是盐的一个总称,若细分下来,德晟总共能提供7种不同的的酯(见下表)供各位选择,那么究竟这7中酯有什么异同点呢?让我们继续向下看。 德晟酯种类: 1.1 酯0号-酯(AE-NHS ) 【CAS】无 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】N/A 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.2 酯1号-酯(DMAE-NHS) 【英文名】2',6'-dimethyl-4'-(N-succinimidyloxycarbonyl)phenyl-10-methyl-acridinium-9-carboxylate methosulfate 【中文名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-烷基)氧基]羰基]-2,6-二氧基]羰基]-10-甲 基酸盐 【CAS】115853-74-2 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】594.13,C29H26N2O10S 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.3 酯2号-酯(Me-DMAE-NHS) 【英文名】2',6'-Dimethylcarbonylphenyl 10-Methyl-9-acridinecarboxylate 4'-NHS Ester Triflate 【中文名】2',6'-二羰基基10--9-酯4'-NHS酯三氟磺酸盐 【CAS】无(115853-74-2, DMAE-NHS类似物) 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】632.56,C29H23F3N2O9S 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.4 酯3号-酯(NSP-DMAE-NHS) 【英文名】2',6'-DiMethylcarbonylphenyl-10-sulfopropylacridinium-9-carboxylate 4'- NHS Ester 【中文名】9-[[4-[[(2,5-二氧代-1-烷基)氧基]羰基]-2,6-二氧基]羰基]-10-(3- 磺基)-内盐 【CAS】194357-64-7 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】590.6,C30H26N2O9S 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.5 酯4号-盐(NSP-SA) 【英文名】3-[9-(((3-(carboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt 【中文名】盐(NSP-SA) 【CAS】211106-69-0 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】584.66,C28H28N2O8S2 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.6 酯5号-盐(NSP-SA-NHS) 【英文名】3-[9-(((3-(N-succinimidyloxycarboxypropyl)[4-methxylphenyl]sulfonyl)amine)carboxyl]-10-acridiniumyl)-1-propanesulfonateinner salt 【中文名】盐(NSP-SA-NHS) 【CAS】199293-83-9 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】681.73,C32H31N3O10S2 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 1.7 酯6号-酰肼(NSP-SA-ADH) 【CAS】无 【外观】黄色固体或粉末 【纯度】≥98% 【分子量】740.85,C34H40N6O9S2 【存储条件】-20℃,避光 【运输条件】48小时内可室温(20-25℃)运输,**过48小时需要在-20℃条件下运输 二.酯的结构区别 六种酯,其中 1~3 号为酯类;4~6 号为磺酰胺内盐;1~4 号为 NHS 活性酯;5 号为 羧酸,含羧基;6 号为酰肼,含有游离氨基。 三.抗水解性能与稳定性 传统酯 0 号(AE-NHS),1~3 号在其结构上进行了修饰,增大了位阻,增强了抗水解性。0 号只在 酸性溶液中稳定,当 pH 值大于 6.3 后易水解,而 1~3 号则不然,如在室温下,在 pH 为 7.0 的 PB 缓冲液中很 稳定,16 天后,发光活性只降低 3.6%。 4~6 号则是引入了磺酰胺基团,其稳定性较酯类(0~3 号)高, 其原因是由于 C-N 键与 C-O 键的 键级不同,C-N 键大于 C-O 键。酰胺类化合物(4~6 号)抵抗水解的能力也强于酯类(0~3 号)化合 物。4~6 号在酸性溶液中(pH<4.8)都很稳定,与蛋白质偶联物在室温下保存 4 周,其光**产率不降低,冻干品 在-20℃下,可以保存一年以上. 四.亲水性 3~6 号在 1~2 号的基础上,在亲水性上进行了修饰,引入了丙磺酸内盐,增加了其水溶性,使其与抗体、 核酸等形成的标志物有水溶性,在之后的发光检测可以在水中进行。 五.标记方式的区别 由于抗体的实质是蛋白,其含有胺基,可直接与 1~4 号(NHS 活性酯)发生反应,进行偶联。 5 号为羧酸,需要加入缩合剂 EDCI 等,才能与含胺基的蛋白发生偶联反应。 6 号为酰肼,含有游离氨基,酰肼末端适用直接偶联含有醛基的多糖,核酸或者蛋白质等。 六.发光性能的比较 由于 1~6 号,它们的发光母体与机理一致,其发光性能应该差别不大。